CHIP-seq服務(wù)

CHIP-seq，指的是結(jié)合位點(diǎn)分析法，作用為研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（Chromatin Immunoprecipitation，ChIP）也稱結(jié)合位點(diǎn)分析法，是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的有力工具，通常用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)或組蛋白特異性修飾位點(diǎn)的研究。

將ChIP與第二代測(cè)序技術(shù)相結(jié)合的ChIP-Seq技術(shù)，能夠高效地在全基因組范圍內(nèi)檢測(cè)與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等互作的DNA區(qū)段。ChIP-Seq的原理是：首先通過(guò)染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChIP）特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA的片段，并對(duì)其進(jìn)行純化與文庫(kù)構(gòu)建；然后對(duì)富集得到的DNA的片段進(jìn)行高通量測(cè)序。研究人員通過(guò)將獲得的數(shù)百萬(wàn)條序列標(biāo)簽精確定位到基因組上，從而獲得全基因組范圍內(nèi)與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等互作的DNA區(qū)段信息。

ChIP-Seq與傳統(tǒng)的ChIP-chip技術(shù)相比具有靈敏度高、靈活性強(qiáng)、分辨率高、不具備其他芯片相關(guān)負(fù)效應(yīng)等明顯優(yōu)勢(shì)。

該技術(shù)流程主要分為兩部分：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)獲取及生物信息分析。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)獲取流程：

1.        將蛋白交聯(lián)到DNA上。以保證蛋白和DNA能夠結(jié)合，找到互作位點(diǎn)。

2.        通過(guò)超聲波剪切DNA鏈。

3.        加上附上抗體的磁珠用于免疫沉淀靶蛋白。

4.        接觸蛋白交聯(lián)；純化DNA

5.        定量檢測(cè)，檢測(cè)合格后進(jìn)行測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建、 DNA 成簇（Cluster generation）擴(kuò)增、高通量測(cè)序。

生物信息分析流程見(jiàn)下圖：