慢病毒構建原理

慢病毒載體（Lentivirus）是一類改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒載體，是逆轉錄病毒的一種，基因組是RNA，其毒性基因已經被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒。可利用逆轉錄酶將外源基因整合到基因組中實現穩定表達，具有感染分裂期與非分裂期細胞的特性。

◆慢病毒基因組進入細胞后，在細胞漿中反轉錄為DNA，形成DNA整合前復合體，進入細胞核后，DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉錄成mRNA，回到細胞漿中，表達目的蛋白；或產生小RNA。慢病毒介導的基因表達或小RNA干擾作用持續且穩定，并隨細胞基因組的分裂而分裂。

◆慢病毒載體具有宿主范圍廣，基因容量大等特點。體外應用時，慢病毒載體能夠有效地感染培養的神經元、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞等多種類型原代細胞和大部分細胞系。由于慢病毒的感染具有整合特性，其能夠將外源基因有效地整合到宿主染色體上，因而可以達到持久性表達，從而構建穩轉細胞株，用于基因的細胞功能研究。

◆體內應用時，慢病毒載體的應用不如rAAV載體應用廣泛，因為其具有一定的免疫原性，且隨機整合特性可能導致細胞功能基因的異常。相比較腺相關病毒，慢病毒的擴散范圍較小，但其表達更快、基因容量更大（可容納4kb），可作為大容量基因的載體。